تفاصيل الوثيقة

نوع الوثيقة : رسالة جامعية 
عنوان الوثيقة :
الإنتاج الحيوي وتنقية وتوصيف إنزيم اسبرجينيز من الاكتينوميسيتات المعزولة من المملكة العربية السعودية
Biosynthesis, purification and characterization of L-asparaginase from actinomycetes, isolated from Kingdom Saudi Arabia
 
الموضوع : كلية العلوم 
لغة الوثيقة : العربية 
المستخلص : تم عزل أنواع مختلفة من الاكتينوميسيتات من مصادر مختلفة مثل المياة العذبة والمياة البحرية والرمال والتربة وبعض الأسماك والروبيان والرواسب البحرية باستخدام بيئة اجار النشا و النترات الاساسية أو المضاف إليها bekanamycin أو .amphotericin B جمعت العينات المختبرة من مكة والمدينة و جدة ومزرعة هدي الشام. وكانت التربة من بين العينات، تضم أكبر عدد من الاكتينوميسيتات تليها الرمال والمياه ثم الحيوانات البحرية. وكانت بيئة أجار النشا والنترات هي الأكفاء من بين البيئات المستخدمة في عزل الاكتينوميسيتات من المصادر المختلفة. أدت إضافة bekanamycin إلى إنخفاض عدد الاكتينوميسيتات المعزولة لكنه سمح لمزيد من العزلات المقاومة بالظهور. أما إضافة amphotericin B فأدت الى تثبيط نمو الفطريات وتحسين عملية عزل الاكتينوميسيتات. تم عزل وتنقية 100 عزلة من الاكتينوميسيتات كان من بينها 11 عزلة فقط لها قدرة جيدة على إنتاج كميات متفاوتة من L-asparaginase في البيئه الصلبة والسائلة. وكانت العزلة ATRM47 الأكثر نشاطاً من بينها في إنتاج أعلى كمية من إنزيم L-asparaginase معزولة من منطقة الريزوسفير حول جذور شجرة النخيل من المدينة المنورة. وقد أختيرت من أجل إجراء المزيد من الدراسات عليها. حيث تمت دراسة تأثير مجموعة من العوامل الفيزيائية والكيميائية مثل تأثير مصادر الكربون والنتروجين وبعض الأحماض الأمينية والعضوية ودرجة حرارة التحضين و درجة الحموضة الإبتدائية وسرعة الدوران وكمية اللقاح المضاف على نمو العزلة ATMR47 وإنتاج إنزيم L-asparaginase الداخلي والخارجي . أظهرت النتائج أن الظروف المثلى لإعطاء أفضل نمو وإنتاج للإنزيم تكون عند رقم هيدروجيني 6,5 ، ودرجة الحرارة 30 درجة مئوية، مع سرعة دوران 100 لفة في الدقيقة والتحضين لمدة 5 أيام، مع إضافة الدكستروز 5 ٪ والاسبراجين 1,5 ٪ كمصدر للكربون والنيتروجين على التوالي. وكان تركيز كمية اللقاح inoculums عند مستوى CFU/ml4x 510 ودون أية إضافة للأحماض الأمينية الأخرى. تمت تنقية الإنزيم باستخدام كروماتوجرافيا العمود وكان الوزن الجزيئي للإنزيم الخارجي 120 كيلو دالتون و للإنزيم الداخلي 140 كيلو دالتون. أظهر الانزيم النقي الداخلي Intracellular L-asparaginase نشاطا ضد خلايا الدم السرطانية EAC حيث كانت نصف الجرعة القاتلة LD50 150 وحدة/ملل. واختص الإنزيم تحت الدراسة بالرقم الهيدروجيني الأمثل 8,5 و درجة الحرارة المثلى 37 درجة مئوية ، وتركيز مادة التفاعل اسبرجين 30 ملي مول. زاد نشاط الإنزيم في وجود مادة الجلسرول والمانيتول والسربتول و كلوريد الكالسيوم وكان لإضافة مادةEDTA وايزوبروبانول ومركبتوميثانول وكبريتات الحديد وكبريتات النيكل تأثير مثبط للإنزيم. كشف تحليل مكونات الخلية ان السلالة المعزولة لها جدار خلوي من النوع الأول كالموجود في جنس الاستربتوميسس. وبعد دراسة صفاتها المورفولوجية والفسيولوجية والبيوكيميائية والجينية عرفت العزله البكتيرية المنتجة لإنزيم L-asparaginase على أنها Streptomyces filipinensis . 
المشرف : د. ماجدة محمد علي محمد 
نوع الرسالة : رسالة دكتوراه 
سنة النشر : 1431 هـ
2010 م 
المشرف المشارك : د. محمد قربان عبد الهادي قشاري 
تاريخ الاضافة على الموقع : Saturday, September 25, 2010 

الباحثون

اسم الباحث (عربي)اسم الباحث (انجليزي)نوع الباحثالمرتبة العلميةالبريد الالكتروني
سامية درويش جستنيهJastaniah, Samyah Darwishباحثدكتوراه 

الملفات

اسم الملفالنوعالوصف
 27660.pdf pdf 

الرجوع إلى صفحة الأبحاث